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大肠杆菌检测培养基的配方及原理

放大字体  缩小字体 发布日期:2016-12-13  来源:豆丁网  浏览次数:1405
核心提示:本文主要对大肠杆菌微生物检测培养基的配方及原理进行了介绍,为化验从业人员提供参考!
1 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)

原 理:

  月桂基硫酸钠,别名月桂醇硫酸钠,表面活性作用强,具有乳化作用。
  一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的浅黄色粉末。具有色浅、易溶、透明、无沉淀等良好的物理性状。含有丰富的氮源、氨基酸等胰蛋白胨或胰酪胨 20g 提供碳源和氮源满足细菌生长的需求 。
 
配方:(g/L)


2 煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤(Brilliant Green Lactose Bile Broth) 

原理:

  胆盐(Bile Salt):是一种胆酸的钠盐,是胆酸的羧基和甘氨酸或牛磺酸(C2H7NO3S)的氨基(C2H5NO2),通过酰胺键结合而成。
① 可降低培养基与细菌细胞膜界面上的表面张力,使细胞膜紊乱,导致细菌自溶。
②肠杆菌科细菌在肠道内长期与胆汁接触。对胆盐有一定的抵抗力。合适的胆盐量能促进该科细菌的生长。
③胆盐遇酸生成沉淀,使菌落色素不致扩散从而有利于鉴别。
④ 胆盐中含有一定量的胆红素、粘蛋白、色氨酸,对不受胆盐抑制的细菌生长有营养作用。
  煌绿(亮绿):抑制革兰氏阳性菌和大多数非沙门氏菌的革兰氏阴性杆菌,通常抑制发酵乳糖、蔗糖的细菌。煌绿和枸櫞酸钠对大腸菌的生长、菌体蛋白质的合成和糖的利用都有显著的抑制作用,以煌绿的作用为较强。枸酸钠能抑制大腸菌的呼吸,而煌绿的抑制作用则较弱。混合胆盐及硫代硫酸钠对大腸菌的上述代谢活动都没有抑制作用。
 
配方:(g/L)


 
用法:

  将蛋白胨、乳糖溶于约500 ml蒸馏水中,加入牛胆粉溶液200 ml(将20.0 g 脱水牛胆粉溶于200 ml 蒸馏水中,调节pH至7.0~7.5),用蒸馏水稀释到975 ml,调节pH,再加入0.1%煌绿水溶液13.3 ml, 用蒸馏水补足到1000 ml,用棉花过滤后,分装到有玻璃小倒管的试管中,每管10ml 。121 ℃高压灭 15 min 。
 
3 伊红美蓝琼脂(EMB)Eosin-Methylene Blue Agar

原理:

  伊红美蓝琼脂含有伊红和美蓝两种苯胺类染料,它们可以抑制革兰氏阳性菌的生长。伊红为酸性染料,美蓝为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色,再与美蓝结合形成紫黑色菌落,并带有绿色金属光泽。而产气杆菌则形成呈棕色的大菌落。
  在碱性环境中不分解乳糖产酸的细菌不着色,伊红和美蓝不能结合,故沙门氏菌等为无色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培养基上不生长。
常用的伊红美蓝乳糖培养基,可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌。如果有大肠杆菌,因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸,菌体带H+,故菌落被染成深紫色,从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。
 
配方:(g/L)



用法:

  称取本品 37.4g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌 15分钟, 备用。 
 
4 EC肉汤 (E.Coli Broth)

用途:

  用于粪大肠菌群、大肠杆菌的测定(GB2008、SN标准)
 
配方:(g/L)


 
5 营养琼脂斜面 营养琼脂(NA)Nutrient Agar

用途:

  细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用(GB标准)。
 
配方:(g/L)

编辑:foodec007

 
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