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绝对干货—微生物日常检验过程中的注意事项!

放大字体  缩小字体 发布日期:2017-03-24  来源:食品实验室服务公众号  浏览次数:2263
核心提示:微生物检验过程中的细节问题汇总。。。
一、培养基的灭菌及使用

(1)每次配置时,要注意其生产日期是否在保质期内,查看其开瓶日期及瓶口密封性,保证其未变质,并且未吸潮。
(2)培养基配置时,称量要准确,包括盐水的分装要准确。
(3)一定要保证现配制现灭菌,未灭菌的配好培养基不能长时间放置,更不可隔夜。
(4)灭菌时要保证恒温、恒压,同时要保证有效灭菌时间。
(5)灭菌过的培养基要冰箱保存,可保存一周,一般不超过 3 天。而且要遵循“先入先出”原则,先配制的要先使用。
(6)在使用时,要根据当班次的使用量,用水浴锅先将培养基溶化为液态,然后及时调低水域温度(先化好的可从水域取出,放在水浴锅锅盖上)待用,千万不可长时间使培养基处于高温状态。
(7)做产品微生物检测时,倾倒培养基温度在 45℃左右,不可过烫,避免将菌烫死;也不可过凉,化好的培养基又结块凝固,不便于观察结果。
(8)每瓶培养基均要做空白。
(9)尽量集中做样,避免频繁打开同一瓶培养基瓶塞,增大培养基的污染几率,出现误差结果。
(10)培养基剩余过少时,可先将其倾倒成空白用板。

二、 做样环境的维持

(1)大环境(房间)
1)做样时,窗户和空调要关闭,或用酒精对房间进行喷雾消毒,避免房间内空气流通影响超净台内部环境(最好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间进行操作)。
2)如果在原来的原料微生物检测室进行做样,要定期开启紫外灯,对房间进行杀菌。
(2)小环境(超净台)
1)定期清洁初效过滤器,要及时更换。
2)做样前,将超净台内部进行清洁,用 75%酒精进行擦拭消毒,并提前半小时将超净台紫外灯打开,对超净台内部环境进行杀菌。
3)关紫外灯,开风机,调整合适进风量,风量不可过低。
4)每次做样后,要对超净台内部进行清理、清洁,并用 75%酒精进行擦拭消毒。
5)紫外灯根据其使用寿命要及时更换。
6)做样同时,要做上相应菌落检测的环境空白。
7)做样区域的选择:
a、一般在距离超净台外沿的 1/3-2/3 区域进行无菌操作;
b、要在酒精灯火焰的外焰保护区域进行操作。

三、 工器具的洁净度

(1)玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌。
(2)做样用剪刀、勺子等物品要做到做样专用,不可与其它操作器具混用,使用时,先用75%酒精消毒,再采用灼烧方式进行灭菌。
(3)接种针(环)采用灼烧方式进行灭菌,但要注意做样时要先将接种针(环)进行冷却。

四、样品的采集及检测

(1)保证采样器具的无菌性
1)玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌,保证恒温、时间足够(但不可时间过长,导致玻璃器皿易裂纹而报废)。
2)取样筐:使用前要用75%酒精进行喷洒消毒。
3)取样勺:要保证其清洁消毒,清洁后用75%酒精进行擦拭消毒。
4)取样袋:可先用酒精进行擦拭消毒,再在超净台用紫外灯照射消毒,(包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒)。
5)电子称表面用 75%酒精消毒。
(2)人员操作
1)保证手部的清洗、消毒:取样前及做样前都要先洗手再消毒。
2)取样要具有代表性(随机样、目的样、综合样)且要标示清楚。
3)取样完毕,不可在车间逗留,要及时将样品放入超净台,对其外表面进行紫外灯照射消毒。
4)在要求的做样区域进行操作。
5)做样前,要用 75%酒精棉球对样品袋口部进行擦拭消毒,再开口。
6)往盐水瓶加样品时,要注意勺子或袋子尽量不接触瓶口。
7)样品计量要准确,稀释倍数也要准确(1mL 吸管不允许将管口敲掉),进行 100 倍稀释时,1mL 吸管要伸入盐水中,不可以将样品从管壁流下去,同时要避免将管底部捅破。
8)盐水温度以 40℃左右为宜,不能过热,会将部分微生物烫死;也不能温度太低,不能将样品溶解完全。
9)进行稀释时,要摇匀,保证溶液的均一性。
10)倾倒平皿时,要注意培养基瓶口不要接触到平皿;倾倒的培养基要适量,不可以太少,在培养过程中干掉,微生物亦死亡,以 15mL 左右为宜。
11)做大肠菌群样时,要提前将乳糖胆盐培养基培养管按需要量备好,放入超净台对外表面进行紫外线灭菌。
12)接二步时,要注意先将接种针(环)进行冷却,避免出现接不上菌落的情况发生,导致无法判断、确认。
13)做样完毕,及时放入相应培养箱进行培养,并清理清洁超净台。

五、 微生物的培养

(1)在培养过程中,要随时监控培养箱温度,保证其在适宜的温度进行培养。
(2)要按照《微生物检验规范》要求及时观察结果,出现异常,要及时分析原因进行反馈。
编辑:foodec007

 
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