食品伙伴网服务号
当前位置: 首页 » 检验技术 » 培训资料及讲义 » 正文

解读GB/T 4789.6中的PCR确认试验(一)

放大字体  缩小字体 发布日期:2024-07-05  来源:药物微生物检验公众号
核心提示:之前收到网友的提问,想根据GB/T 4789.6-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验》检测产品,但是发现20


之前收到网友的提问,想根据
GB/T 4789.6-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验》检测产品,但是发现2016版与2003版检测过程有所不同,对增加的PCR确认试验的部分有所疑问。
   图片1
标准中“6.5 PCR确认试验”部分详细介绍了PCR实验的基本过程和耗材要求,主要步骤包括菌落挑取、核酸提取、PCR反应体系的配制、PCR循环条件、电泳、结果判定。

  对于经常做PCR的实验员来说,按照标准操作就可以了。但是对于没有做过PCR实验的小白,在拿到标准之后,应该如何准备试剂耗材?怎样进行实验呢?
  今天先来说一说4.28 Marker
【原文】
   4.28 Marker:分子量包含 100bp、200bp、300bp、400bp、500bp、600bp、700bp、800bp、900bp、 1000bp、1500bp条带。
  实验小白心里想:哦莫!PCR实验这么复杂吗?光一个Marker试剂就要准备这么多?不是说PCR比传统的微生物培养好做吗?果断放弃……
Marker是啥?
  DNA Marker(也叫DNA Ladder)由特定分子量的双链DNA片段组成,已混有含蓝色染料的上样缓冲液,适用于琼脂糖凝胶电泳时作为DNA分子量标准。
这么说太官方了,换个说法,Marker就相当于一把尺子,是尺子就肯定有刻度,这个刻度就是不同大小的条带
聪明的你应该也猜到了,其实标准中说的不同分子量的条带其实是在同一个Marker里的。当我们买回来一管Marker,这管Marker里就会有分子量不同的我们需要的条带。
  Marker有不同的规格,常见的有DL2000、DL5000、DL15000、100bp DNA Ladder等。Marker在电泳之后,最后结果观察时会呈现出如下图的条带。这些条带就是“尺子”上的“刻度”。
  Marker的价格也不贵,而且每次上样5μL就足够,1mL的Marker也可以够我们用很久很久了。
  便宜又好用,原来只需要准备1支就可以,是不是长舒一口气?
  只要尝试过PCR实验,它的简便快捷会超乎你想象!
  其实国外很多实验室早已经用PCR的方法进行微生物检测,不仅通量高、准确性还好,国内很多标准也早已使用PCR的方法进行检测,毕竟谁不喜欢简单又高效的检测方法呢?
  希望今天的分享会对您的实验有所帮助。

图片2
如果您有关于PCR的实验困扰也可以联系小编,也可以试一下我们的线下PCR培训课程哦!


编辑:songjiajie2010

 
分享:
[ 网刊订阅 ]  [ 检验技术搜索 ]  [ ]  [ 告诉好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 关闭窗口 ] [ 返回顶部 ]
 

 
 
推荐图文
推荐检验技术
点击排行
检验技术
 
 
Processed in 0.124 second(s), 16 queries, Memory 0.91 M