一、这些细则要遵守

实验室参加实验的人员，必须整洁、文明、肃静。

进入实验室的所有人员必须遵守实验室的规章制度，实验室为无烟实验室，严禁在实验室内吸烟，不得吃口香糖，不得随地吐痰和乱扔纸张。

参加实验的人员在实验过程中，要注意保持室内卫生及良好的实验秩序。实验结束后，必须及时做好清洁整理工作，实验人员必须将工作台、仪器设备、器皿等清洁干净，并将仪器设备和器皿按规定归类放好，不能任意搬动和堆放。所有实验所产生的废物放入废物箱内，并及时处理，清理好现场。

在每次实验结束后，实验人员必须对实验室进行清扫。

实验室主任负责安排日常的卫生清扫、仪器设备的维护保养工作。实验室成员有参加本室清扫及维护保养仪器设备的义务。

实验室内各种设备、物品摆放要合理、整齐，与实验无关的物品禁止存放在实验室。

实验室为保持室内地面、实验台、设备和工作环境的干净整洁，必须坚持每天一小扫，每周一大扫的卫生制度，每年彻底清扫1～2次。

实验室内的仪器设备、各人实验台架、凳和各种设施摆放整齐，并经常擦拭，保持无污渍、无灰尘。

卫生责任人应对实验室桌面、地面及时打扫。注意保持室内场地和仪器设备的整洁卫生。

实验室内杂物要清理干净，有机溶剂、腐蚀性液体的废液必须盛于废液桶内，贴上标签，统一回收处理。

保持室内地面无灰尘、无积水、无纸屑等垃圾。

实验室整体布局须合理有序，地面、门窗等管道线路和开关板上无积灰与蛛网。

下班前必须搞好清洁卫生，关好门窗、水龙头，断开电源，清理场地。

不得将任何与实验无关的物品带入实验室。

对于乱摆放的实验药品、仪器等，实验室负责人有权没收或当做废品处理，实验工作人员不得有任何异议。

二、清洗实验室器皿标准操作规程(SOP)

目的：去除器皿上的残余物，使器皿可重复使用。

范围：化学试验室样品处理过程中使用的器具，如剪钳、刀片、塑料篮、玻璃容器、陶瓷坩锅、微波消解罐等.

【操作规程】

样品拆分工具

1、用800#砂纸轻轻打磨掉金属工具表面的锈渍，不要过度用力，以免磨掉保护涂层，然后，用脱脂棉蘸无水乙醇擦拭，至脱脂棉上看不到污渍为止。

2、剪钳，刀片，研钵使用前必须用脱脂棉蘸无水乙醇擦拭接触样品部位2~3遍，脱脂棉上看不到污渍方可使用。

3、装样品的塑料篮每月至少用洗洁精清洗一次，如有明显斑点、粉尘、则应立即清洗。

4、样品拆分台面每天中午11:30～12:00清理一次，17:30～18:00清理一次，所有工具应整齐，按类别摆放，台面用纸巾擦拭，应无黑斑。

5、玻璃容器(烧杯，试管，漏斗，三角烧瓶，培养皿)、玻璃量器(容量瓶，量筒，移液管)、新购置的玻璃器皿应在硝酸(10%)溶液内先浸泡6小时方可使用。

6、 应把玻璃器皿内的溶液倒入废液桶，自来水冲洗一遍后，方可收集一起浸泡，以免交叉污染。

7、玻璃容器，玻璃量器尽可能分开用自来水浸泡，且让水能完全进入器皿中，不应留有气泡。

8、烧杯，试管，漏斗，三角烧瓶，培养皿等可用瓶刷沾上洗衣粉或洗洁精刷洗，然后用自来水充分冲洗干净。玻璃量器不可刷洗。

9、玻璃量器(容量瓶，量筒，移液管)应用上洗衣粉或洗洁精涮洗，最好用热水(60～70℃)。

10、玻璃器皿经洗涤后，若内壁的水是均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则还需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水充分冲洗。

三、洗涤液的配制与使用 
洗涤液的配制洗涤液分浓溶液与稀溶液两种，配方如下： 

【浓溶液】 

重铬酸钠或重铬酸钾（分析纯）50g 
自来水 150ml 
浓硫酸（分析纯） 800ml 

【稀溶液】 

重铬酸钠或重铬酸钾（分析纯） 50g 
自来水 850ml 
浓硫酸（分析纯） 100ml 

配法都是将重铬酸钠或重铬酸钾先溶解于自来水中，可慢慢加温，使溶解，冷却后徐徐加入浓硫酸，边加边搅动。配好后的洗涤液应是棕红色或桔红色。贮存于有盖容器内。

带好长橡胶手套，除去器皿内的水，慢慢倒入洗涤液，转动器皿，使洗液充分浸润不干净的器壁，数分钟后把洗液倒回洗液瓶中，用自来水冲洗器皿。若器壁上粘有少量残渣，可先将洗涤液加热,加入少量洗液浸泡残渣。

注意: 本操作有危险性!

（a）洗涤液中的硫酸具有强腐蚀作用，千万别忘记将器皿取出冲洗；洗涤液若沾污衣服和皮肤应立即用水洗，再用苏打水或氨液洗；如果溅在桌椅上，应立即用水洗去或湿布抹去；

（b）玻璃器皿投入前，应尽量干燥，避免洗涤液稀释；

（c）此液的使用仅限于玻璃和瓷质器皿，不适用于金属和塑料器皿；

（d）有大量有机质的器皿应先行擦洗，然后再用洗涤液，这是因为有机质过多，会加快洗涤液失效。此外，洗涤液虽为很强的去污剂，但也不是所有的污迹都可清除；

（e）盛洗涤液的容器应始终加盖，以防氧化变质；

（f）洗涤液可反复使用，但当其变为墨绿色时即已失效，不能再用。

经洗涤过的玻璃容器倒置，至无水滴滴下用硝酸(10%)溶液浸泡至少12小时，用DI水涮洗后方可使用。浸泡溶液每星期检测一次Pb Cr Cd Hg含量，超过1ppm则更换溶液。

玻璃量器(容量瓶，量筒，移液管) 用硝酸(30%)溶液浸泡至少12小时后，用DI水涮洗后，在无尘处倒置晾干水分，自然干燥。

玻璃容器(烧杯，试管，漏斗，三角烧瓶，培养皿) 放在电烘箱中烘干，烘箱温度为105℃,保持通风烘1～2h即可。

清洗好的玻璃仪器要分门别类地存放，以便取用。

塑料器皿

塑料漏斗参照玻璃漏斗清洗步骤，可与玻璃漏斗一同清洗。

聚四氟乙烯烧杯和微波消解罐须与玻璃器皿分开处理，先用自来水冲洗干净后，再用配制好的酸液浸泡至少12h。

酸液配制方法：500mL硝酸+100mL冰乙酸，DI水定容于1000mL容量瓶。

酸液每半个月检测一次Pb，超过5ppm则更换溶液

注意:勿用毛刷刷洗塑料器皿!

陶瓷坩锅

可参照聚四氟乙烯烧杯和微波消解罐清洗方法。

若依然不能清洗干净，将陶瓷坩锅置于电热板上加热至无水份后，放入马氟炉中，保持800℃烤2h，取出冷却。

清洗好的陶瓷坩锅内壁应洁白无深色斑点。

临床基因扩增（PCR）检验实验室规范

为避免污染，必须严格遵循《临床基因扩增检验实验室设置标准》设置临床基因扩增检验实验室。

试剂贮存和准备区
贮存试剂和用于标本制备的材料应直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过产物分析区。　　

含反应混合液的离心管或试管在冰冻前都应快速离心数秒。　　

主反应混合液的组成成份尤其是聚合酶的适用性和稳定性通过预试验来检查，评价结果必须有书面报告。

在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套，并经常更换。

严禁用嘴吸取液体，加样器和吸头等必须经高压处理。
工作结束后必须立即对工作区进行清洁。

标本制备区

正确使用加样器。由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的走动。　　

用过的加样器吸头必须放入专门的消毒容器内。实验室桌椅表面每次工作后都要清洁，实验材料如出现外溅，分别处理并作记录。
对实验台适当的紫外照射(254nm波长，与工作台面近距离)适合于灭活去污染。可移动紫外线管灯可用来确保工作后对实验台面的充分照射。
样本处理对核酸扩增有很大影响，必须使用有效的核酸提取方法，可在开展临床标本检测前对提取方法进行评价。
用于RNA扩增检测的样本制备好以后，应立即进行cDNA合成，因为cDNA链较RNA稳定，保存相对容易。为保证逆转录反应的需要，应在标本制备区设置一个以上的温育装置。

cDNA合成的理想温度依所使用的酶而定，倾向于使用一步法：

即使用在扩增反应缓冲液条件下具有逆转录活性的热稳定的DNA聚合酶进行逆转录，其较cDNA合成后再开盖以调节缓液或加入聚合酶进行扩增发生污染的可能性降低。
待测RNA的cDNA拷贝须保存在标本制备区，不得在本区对样本进行PCR扩增。

扩增区

不能从本区再进入任何“上游”区域，可降低本区的气压以避免气溶胶从本区漏出。
为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的走动。如有加样则应在超净台内进行。
打开预处理过的反应混合液时必须防止液体溅出，尤其是在巢式扩增步骤之间。一个简单的方法是在打开反应管前快速离心数秒。　　

完成操作及每天工作后都必须对实验室台面进行清洁和消毒，紫外照射方法与前面区域相同。如有溶液溅出，必须处理并作出记录。

扩增产物分析区
下述操作在本区内进行：扩增片段的测定。
核酸扩增后产物的分析方法多种多样（如，膜上或微孔板上探针杂交方法、琼脂糖凝胶电泳等）
目前国内的商品试剂盒绝大部分均采用非同位素标记的微孔板上探针杂交方法，PCR-ELISA方法，也有膜上探针杂交方法。
注：本区是最主要的扩增产物污染来源，因此必须注意避免通过本区的物品及工作服将扩增产物带出。　　

小结

严格按照实验室清洁卫生要求开展各类实验，是保证实验有效运行与实验员安全工作的前提。要不断完善实验室卫生管理体系，加强实验员的安全意识，保护员工的人身安全，确保实验室工作在清洁、安全、有序的条件下进行。