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三糖铁(TSI)琼脂试验的原理

放大字体  缩小字体 发布日期:2010-05-13  浏览次数:13801
核心提示:  试验方法:以接种针挑取待试菌可疑菌落或纯培养物,穿刺接种并涂布于斜面,置36±1℃培养18~24h,观察结果。  三

  试验方法:以接种针挑取待试菌可疑菌落或纯培养物,穿刺接种并涂布于斜面,置36±1℃培养18~24h,观察结果。

  三糖铁琼脂(TSI)成分
  蛋白胨 20.0g
  牛肉膏 3.0g
  乳 糖 10.0g
  蔗 糖 10.0g
  葡萄糖 1.0g
  硫酸亚铁铵(含6个结晶水) 0.5g
  酚 红 0.025g或5g/L溶液5mL
  氯化钠          5.0g
  硫代硫酸钠        0.5g
  琼 脂 12.0g
  蒸馏水 1000.0mL
  除酚红和琼脂外,将其他成分加入400mL蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10min,加热煮沸至完全溶解,调至pH7.4±0.1。另将琼脂加入600mL蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10min, 加热煮沸至完全溶解。
  将上述两溶液混合均匀后,再加入酚红指示剂,混匀,分装试管(12mm×100mm),每管约2~4mL,高压灭菌121℃ 10 min或115℃15 min,灭菌后置成高层斜面,呈桔红色。

  原理分析本培养基适合于肠杆菌科的鉴定。用于观察细菌对糖的利用和硫化氢(变黑)的产生。该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:10:1,只能利用葡萄糖的细菌,葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸,因接触空气而氧化,加之细菌利用培养基中含氮物质,生成碱性产物,故使斜面后来又变红,底部由于是在厌氧状态下,酸类不被氧化,所以仍保持黄色。

 

  而发酵乳糖的细菌(e.coli),则产生大量的酸,使整个培养基呈现黄色。

  如培养基接种后产生黑色沉淀,是因为某些细菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氢,硫化氢和培养基中的铁盐反应,生成黑色的硫化亚铁沉淀。

提问:志贺氏菌都能分解葡萄糖,产酸不产气,大多不发酵乳糖,不产生H2S。应该产生什么现象?

   大肠杆菌,能分解葡萄糖产酸产气,大多数能分解乳糖,不产生H2S。应该是什么现象?

   沙门氏菌,能分解葡萄糖,不发酵乳糖,大多数产生H2S,多数产气。

下面照片所示2-3-4,可能是大肠杆菌、沙门氏菌还是志贺氏菌?

答案:2-志贺氏菌  3-沙门氏菌  4-大肠杆菌

编辑:foodyy

 
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