设为首页
加入收藏
联系站长
首 页 食品资讯 政策法规 生产技术 质量管理 检验技术 仪器设备 食品标准 资料中心 科技文献 食品图库
食品人才 食品安全 食品课堂 专业英语 食品专题 食品网刊 食品网址 食品百科 食品书店 个人空间 食品论坛
当前位置:首页>食品专题>生物实验技术>形态学研究技术>- 人体间期细胞X—小体的制备
人体间期细胞X—小体的制备
 
食品伙伴网 (2006-07-08) 进入论坛  
 

一、原理
1949年Barr等发现,在雌性体细胞中的两条X染色体有一条(或这条的大部分)处于凝集不活动状态,从而形成X-小体(或称X-染色质、性染色质、Barr小体)。进而发现,所有哺乳类雌体细胞中都有一条这种表现的X染色体,当在个用雌或雄体中,有多于2条X染色体时,在间期细胞内除一条外,其余均形成X-小体。
人类正常的男女体细胞中,22对常染色体并无区别,但其性染色体分别为XY和XX。女性的两条X染色体中,有一条在间期呈现浓缩状态,可由适当的染料显示。正常女性间期细胞中X小体阳性率约为30—50%。
二、仪器、用品及试剂
光学显微镜,恒温水浴箱;
牙签、载玻片、染色缸;
Carnoy固定液(甲醇∶冰乙酸=3∶l)70%乙醇,硫堇染液;
5N HCl,0.2%甲苯胺兰染液。
三、操作步骤
(一)方法一
l.取材、涂片:取女性口腔上皮细胞均匀涂布在洁净载玻片上。
2.固定:涂片后立即95%乙醇中固定30分钟(不可干燥)。气干。
3.染色:玻片在蒸馏水中冲洗几次后5N HCl(22℃)水解10分钟,蒸馏水洗去多余HCl,硫堇染色30分钟。水洗。
4.镜检、气干后即可镜检。若背景颜色过深可在75%乙醇、95%乙醇中分色后再镜检。
(二)方法二
l.取女性口腔上皮细胞涂片。待干燥。
2.Carnoy固定液中固定15分钟。干燥。
3.5N HCl中10分钟。水洗。干燥。
4.0.2%甲苯胺兰染色2—5分钟。水洗。气干。
5.镜检。
四、注意事项
l.涂片时应均匀涂成单层,取材细胞要多些。取材前应漱口。
2.镜检应选择完整、核质中颗粒均匀的细胞观察,X-小体大小约为1μm,多位于细胞核边缘。
3.统计X-小体阳性率,计数应选300—500个细胞。
五、试剂
1.硫堇染液配方:
①4%硫堇原液:4g硫堇粉末置研钵中以50%乙醇100ml研磨溶解。过滤。
②Michaelies缓冲液:醋酸钠9.714g,巴比妥钠14.714g加双蒸水至500ml。
③硫堇工作液(PH5.7):0.1N HCl 32ml
Michaelies缓冲液28 ml
4%硫堇原液400ml
2.甲苯胺兰染液配方:
0.2g甲苯胺兰粉末溶于100ml双蒸水中即可。


作者:
文章来源:
Tag: 细胞 染色 染色体 固定 X- 乙醇 女性 干燥 小体
 ↑返回顶部   打印本页   关闭窗口↓
文章搜索
热点文章
食品论坛新帖

 

 相关文章
·产前诊断性染色质检查
·产前诊断染色体检查
·遗传携带者的检出
·连锁分析
·最小化非特异性染色方法
·细胞培养染色体显示
·染色体GTG标本制备
·姐妹染色单体差别染色
·人外周血染色体制备
·核仁组织者区的AgNO3染色
种族差异比较
产前诊断性染色质检查
产前诊断染色体检查
遗传携带者的检出
遗传的基因诊断方法
连锁分析
最小化非特异性染色方法
细胞培养染色体显示
染色体GTG标本制备
姐妹染色单体差别染色
人外周血染色体制备
核仁组织者区的AgNO3染色
羊水细胞染色体标本的制备
染色体CBG标本制备
胸腹水染色体标本制备
骨髓细胞染色体标本的制备
染色体结构显示和检测方法
RNAi技术在功能基因组中的应用
非特异性染色的主要因素
消除非特异性染色的方法
荧光抗体染色方法
酵母固定化细胞的肌动蛋白染色
苏木素-伊红染色(HE染色法)
酵母活体染色
分辨荧光分析法
细胞凋亡的形态学检测
细胞凋亡的形态学检测
分辨荧光分析法
酵母活体染色
苏木素-伊红染色(HE染色法)