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用异硫氰酸胍和有机溶剂提取RNA

放大字体  缩小字体 发布日期:2006-04-26

 

  收集细胞,离心5000r/min ,5分钟,弃上清,加入异硫氰酸胍变性液(异硫氰酸胍4mol/L;柠檬酸钠25mmol/L,Sarkosy10.5%,β-巯基乙醇0.1mol/L)500ml,混匀,振荡10秒,加2 mol/L醋酸钠50ml,水饱和酚500m l和氯仿/异戊醇(49:1)100m l颠倒混合数秒钟,冰浴15分钟,4℃离心10,000 r/min,15分钟,吸取上清,加入等体积异丙醇或2倍体积无水乙醇,4℃离心10,000 r/min,10分钟,弃上清,70%酒精洗涤一次,抽干,加35mlDEPC处理水溶解,取5ml经稀释后紫外测定RNA提取量,其余30ml分装,-20℃保存备用。

 
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