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双酚A检测试剂盒说明书

放大字体  缩小字体 发布日期:2011-03-14  来源:北京华安麦科生物技术有限公司  浏览次数:1650
核心提示:双酚A检测试剂盒说明书
一、概要
双酚A(BPA)是生产聚碳酸酯塑料的主要原料之一,而它与乳腺癌、前列腺癌和性早熟有关。BPA无处不在,从矿泉水瓶、医疗器械到及食品包装的内里,都有它的身影。每年,全世界生产2700万吨含有BPA的塑料。但BPA也能导致内分泌失调,威胁着胎儿和儿童的健康。癌症和新陈代谢紊乱导致的肥胖也被认为与此有关。
 双酚A检测试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点, 能最大限度地减少操作误差和工作强度 。

二、试验原理
 双酚A检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在微孔条上预包被偶联抗原,样本中的残留物双酚A与微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗双酚A的抗体,加入酶标二抗后,经TMB底物显色,样本吸光度值与其所含双酚A的含量成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中的双酚A含量。

三、适用范围
 可定性、定量检测食品包装袋、塑料瓶等样本中双酚A的残留量。

四、交叉反应率
    双酚A ………………………………………  100%

五、操作步骤:
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔放入自封袋,保存于2~8℃。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5  加标准品/样本:加标准品/样本50l/孔到对应的微孔中,然后加入双酚A抗试剂50l/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液250l/孔,充分洗涤4~5次,每次间隔10s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、加酶标物:加入双酚A酶标物100l/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min,取出重复洗板步骤6。
8、显色:加入底物液A液50l/孔,再加底物液B液50l/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应15~20min。
9、测定:加入终止液50l/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值。(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。

六、检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒灵敏度:0.5ppb
样本最低检测限:5 ppb
回收率:
食品包装袋…………………………………85±10%
塑料瓶………………………………… 80±10%
精密度:试剂盒的变异系数均小于10%

七、注意事项
1、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温(20~25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3、每加一种试剂前需将其摇匀。
4、反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。
5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
7、在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为15~20min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到30min。反之,则减短反应时间。

八、贮藏条件及保存期
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。
保存期:该产品有效期为12个月。
编辑:songjiajie2010

 
关键词: 双酚A 试剂盒
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