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真菌培养基

放大字体  缩小字体 发布日期:2012-09-19  来源:生物在线  浏览次数:2215
核心提示: 真菌培养基

一、沙保罗琼脂培养基
[用途]
供真菌及酵母样真菌的分离培养用.
[配法] 
麦芽糖40g,蛋白胨10g,琼脂20g,蒸馏水1L.              
将上述成分溶于水,加热溶解,调pH至6.0±0.2,分装三角瓶或试管中,118℃灭菌15min,倾注平板或置斜面,无菌试验后备用.
[用法]
将标本接种培养基,如系血液标本,则采取1~2ml,与冷却至45℃左右沙保琼脂混合,倾注接种平板.分别置35℃和25℃恒温箱内同时培养.35℃培养48h,25℃需连续培养5天,逐日观察结果.发现真菌及酵母样可疑菌落,转种沙保菌斜面,获得纯培养后进行鉴定.
[质量控制]
白色念珠菌和新型隐球菌生长良好.
注:
⑴ 本培养基如不加入琼脂,即为沙保罗液体培养基,供真菌及念珠菌的增菌培养用.
⑵ 增加氯霉素0.05~0.125mg/ml或放线菌酮0.5mg/ml,可抑制细菌和污染的霉菌及隐球菌生长.此二种药均耐热,可直接加入培养基内高压灭菌.
⑶ 添加酵母浸膏5mg/ml,可促进皮肤癣菌生长.增加维生素B 0.1mg/ml,可促进紫色癣菌和断发癣菌生长.
⑷ 将麦芽糖减少到20g/L,为沙保罗20g/L麦芽糖琼脂培养基,可供诱导真菌产生孢子用.
⑸ 该培养基呈酸性,应提高20%的琼脂用量.
 
二、玉米粉琼脂培养基
[用途] 
鉴定酵母样真菌用.白色念珠菌在该培养基上25℃24h培养可长出假菌丝,顶端有典型的厚壁孢子,可与其它念珠菌鉴别.
[配法]
玉米粉4g,琼脂粉8g,蒸馏水1L
(pH6.0±0.2).
将细米粉加水浸泡数分钟,扎紧瓶口,浸入60℃水浴4h,取出后用沙布过滤,除去粗渣,补足水分.无须调整pH.加入琼脂,煮沸溶解,有沉淀物再过滤1次,分装试管,121℃灭菌15min备用.
用玻璃片法点种后,置平皿内,保持一定湿度,置23~26℃下培养24~48h.取出玻片培养物,用高倍镜观察真假菌丝和有无厚壁孢子.
[质量控制]
白色念珠菌(ATCC 26790)厚膜孢子阳性;新型隐球菌(ATCC 9763)厚膜孢子阴性.
注:
⑴ 玉米粉可用糯米粉或可溶性淀粉代替,效果相同.
⑵ 该培养基加入10ml/L Tween-80,制成玉米粉Tween-80琼脂,用途相同,效果更好.
编辑:songjiajie2010

 
关键词: 真菌培养基
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