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血液DNA提取试剂盒-血液DNAout

放大字体  缩小字体 发布日期:2006-05-22  浏览次数:3497
产品索引 5859
中文名称: 血液DNA提取试剂盒
英文名称: 血液DNAout
产品编号: 3671

产品类别:

分子生物学
生产厂家: 国产
产品价格: 90元
产品规格: 10 次(简装)
产品介绍:
本产品用于提取新鲜或冷冻的动物(包括禽类)及人抗凝全血基因组DNA。
 
性能指标:
1.DNA纯净,OD260/280在1.8-2.0之间。不含蛋白质和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、杂交等。DNA产量为30-50 ml/mL全血。
2.操作简单,整个过程约15分钟,室温操作,适合大规模样品处理。血液处理量可达1 mL,不需要柱子,不会发生其他同类产品经常发生的堵塞现象。
3.价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格只有其一半左右。
4.安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
 
使用方法:
将20-200 mg克剪碎的组织或0.1-1 ml血液直接加到0.75 ml溶液A中短暂匀浆,65℃保温5分钟后15000 g离心1分钟,上清尤氲忍寤?芤?SPAN lang=EN-US>B混匀, 冰浴2分钟,15000 g离心1分钟,上清加入等体积的氯仿(自备)混匀后15000 g离心5分钟,最后用等体积异丙醇沉淀上清得到DNA沉淀,用1 ml 75%乙醇(自备)清洗2次后将沉淀溶于缓冲液中待用。
 
实验数据:
图一:血液DNAOUT效果图

图注:用本产品提取1 ml兔全血(左图)和0.1 ml抗凝鸡全血(抗凝剂:血液=1:1)得到的DNA(中图),得到的DNA分别溶于50 ml和250 ml TE后取10 ml上样,在0.8%琼脂糖凝胶和1 X SuperBuffer中300 V电泳10分钟后直接在UV灯下照相。M为全长l 嗜菌体DNA。按国内某试剂盒提取方法提取0.2 ml鸡血,柱子在离心后被堵, 实验失败(右图)。

 表一: 血液DNAOUT与国内某试剂盒提取血液DNA数据比较 

 
260/280
产率
兔全血
1.61(3)
16.58(3)
鸡全血
1.82(3)
626.8(3)
鸭全血
1.83(3)
948.71(3)

 
关联产品:
微量DNA助沉剂DNAdown
非冻型DNA组织保存液:DNALOCKER
超快DNA电泳缓冲液:SuperBuffer
 
血液DNAOUT 提取试剂盒使用说明
 
:   血液DNAOUT 提取试剂盒简介
适用对象     新鲜或冷冻的动物及人抗凝全血基因组DNA的提取。
作用原理     所含去污剂裂解细胞并释放出DNA,所含DNase抑制剂能抑制DNase的活性,所含去蛋白剂能清除血液细胞中所含的蛋白质成份。所含RNase能去除RNA的污染。
试剂盒成份       “溶液A”,“溶液B”和“溶液C”。
性能指标          DNA产量与国内同类产品相当。
使用优点    操作简单     整个过程约15分钟,室温操作,适合大规模样品处理。
DNA纯净    获得的DNA纯度高,可直接用于PCR、酶切、杂交等。
价廉物美      与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜一半左右。
安全无毒    本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
物理特性     2-8℃保存,保存期限为12个月。
自备试剂     氯仿,异丙醇,75%乙醇。
 
血液DNAOUT的使用
1.  在1ml抗凝全血中加入0.5ml“溶液A”(冷冻血需先37℃水浴融化),吹打混匀。
2.       室温离心15000rpm,2分钟,沉淀呈红色。小心倾去上清。
3.       再加入1ml“溶液A”,轻柔的吹打混匀,使细胞完全分散。
4.       室温离心15000rpm, 2分钟,沉淀呈粉白色。倾去上清。
5.       加入0.6ml“溶液B”(用前摇匀),用1ml吸头彻底吹打混匀。
6.       68℃水浴10分钟(此步可省略,但产量略有降低)。
7.       加入0.2ml氯仿和0.3ml“溶液C”,立即小心的颠倒混匀。
8.       室温离心15000rpm,3分钟,小心将上清(约0.7ml)转移至一新的离心管中,加入等体积异丙醇,轻柔的颠倒混匀5-8次,此时出现絮状DNA沉淀。
9.       室温离心15000rpm,1分钟,去尽上清。
10.  加入75%乙醇洗涤沉淀,室温离心15000rpm,1分钟。
11.  重复步骤10。
12.  室温干燥DNA沉淀10分钟,加入TE缓冲液0.1-0.3ml。65℃水浴10分钟溶解DNA,中速振荡5秒混匀。
 
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