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胶原蛋白的纯化策略

放大字体  缩小字体 发布日期:2024-10-28  来源:博格隆(浙江)生物技术有限公司
核心提示:胶原蛋白的纯化工艺应根据表达系统和应用需求选择。若在构建时设计了标签,可采用亲和层析进行高效纯化;若无标签,则可根据胶原

胶原蛋白的纯化工艺应根据表达系统和应用需求选择。若在构建时设计了标签,可采用亲和层析进行高效纯化;若无标签,则可根据胶原蛋白与杂蛋白的电荷、疏水性及分子大小等差异,选择离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析等方式,或通过复合模式层析进一步提高纯度。这些方法可灵活调整,以满足不同的应用和纯度需求。

亲和层析是一种基于特异性结合的分离方法,常用于重组胶原蛋白的初步纯化。通过在表达的胶原蛋白中插入标签,如His标签,对目标蛋白进行特异性结合捕获。

Ni2+对His标签具有特异性亲和,可以使用博格隆Ni Bestarose FF或Ni Bestarose HP等已鳌合金属离子的亲和填料进行捕获,通常一步可达到80%以上的纯度,杂质去除效果好。随后,再使用分子筛进行精纯以及浓缩换液,得到胶原蛋白原液。

编辑:songjiajie2010

 
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