VIP标识 上网做生意,首选VIP会员| 设为首页| 加入桌面| | 手机版| RSS订阅
食品伙伴网,关注食品安全,探讨食品技术
 
当前位置: 首页 » 食品专题 » 生物实验技术 » 细胞实验技术 » 正文

固定细胞的PI单染色法

放大字体  缩小字体 发布日期:2006-07-08

方法一

1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。
2.3ml PBS洗一次。
3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。
4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。
5.400目的筛网过滤1次,500~1000r/min离心5min,弃去PBS。
6.用1ml PI染液,4℃避光30min。
7.流式细胞仪检测:PI用氩离子激发荧光,激发光波波长为488nm,发射光波波长大于630nm,产生红色荧光,可分析前散射光对侧散射光的散点图及PI荧光的直方图。

方法二

1.收集细胞(1×106个),500~1000r/min离心5min,弃去培养液。
2.1ml PBS/FCS洗一次。
3.500~1000r/min离心5min去PBS/FCS,加入500μl PBS/FCS和500μl的多聚甲醛固定液,轻轻混匀,在4℃下固定4min。
4.500~1000r/min离心5min弃去固定液,室温加入含0.2% Tween的PBS 1ml,37℃孵育15min。
5.1ml PBS/FCS洗3次,每次5min。
6.400目的筛网过滤1次。
7.500~1000r/min离心5min去PBS/FCS,用1.0ml PI染液,4℃避光至少30min。染色在24h之内皆可行,流式细胞仪分析。

 

 
[ 网刊订阅 ]  [ 食品专题搜索 ]  [ ]  [ 告诉好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 关闭窗口 ] [ 返回顶部 ]

 

 
推荐图文
推荐食品专题
点击排行
 
 
Processed in 0.145 second(s), 18 queries, Memory 0.88 M