自由能 free energy 在物理化学中，按照亥姆霍兹的定容自由能F与吉布斯的定压自由能G的定义，G=F PV （p为压力，V为体积）。在生物的反应中，因为△（PV）可以忽略不计，所以两者是相同的。只有这样，F的变化△F=△U-T△S才成为主要讨论的问题（U、T、S分别是该系统的内能、绝对温度、熵）。△F给出了生物反应中释放出来可用于做功的能量上限。其变化量（一般用△G*表示）在生物学上使用时必须注意下列事项：（1）水的活度，可随意设为1.0进行计算：（2）因[H ]=1M并不符合实际情况，一般认为[H ]=10-7M（pH7），为了区别其符号写成△G0′；（3）例如反应，因各种成分并非标准浓度（1M），把实际浓度代入下式后其值△G′就有问题了；
（4）在共轭反应中，要注意各种成分反应的变化量之和；（5）把△G0改为用平衡常数（Keq）表示，往往是很有用的。例如在25℃下
△G0=-RT1nKeq=-1363log10Keq