5. 组织匀浆

（1） 用预冷的 PBS（0.01M，PH7.4）冲洗组织以除去表面残留的血液或杂质。

（2） 将组织块称重，然后切成尽可能小的碎块，以便充分匀浆。

（3） 加入适量的预冷 PBS（体积取决于组织的重量，9 mL PBS 适用于 1 g 组织，建议使用前立即在 PBS 中加入适量蛋白酶抑制剂），用玻璃匀浆器在冰上或冰浴中充分匀浆。 

（4） 将匀浆液吸入离心管中，4℃ 下以 5000×g 离心 5~10 分钟，收集上清液，保存至-20℃或-80℃， 避免反复冻融。

一般来说，由于 ELISA 实验只能检测可溶性蛋白质的含量，因此要求样本应清晰透明并离心除去沉淀物或悬浮物质。为确保实验的准确性，-20℃或-80℃保存的样本应在 1~6个月内完成检测，4℃保存的样本在一周内完成检测。