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反向间接乳胶凝集反应

放大字体  缩小字体 发布日期:2006-06-27  浏览次数:909

原理

同炭凝,只是载体换为聚苯乙烯乳胶,它是一种由0.6μm~0.7μm的颗粒所组成的胶体溶液,具有良好的吸附蛋白质的性能。

间接乳胶凝集目前已用于鼠疫菌、沙门氏菌、流感杆菌、脑膜炎双球菌、葡萄球菌肠毒素等的诊断。


材料与试剂

1.聚苯乙烯乳胶

2.免疫血清

3.正常血清

4.标准抗原

5.待检抗原

6.0.02Mol/L pH8.2硼酸缓冲液

硼砂 6.67g

硼酸 8.04g

H2O 加至 1 000ml

7.生理盐水


操作方法

1.乳胶液制备 取聚苯乙烯乳胶0.10ml,加灭菌蒸馏水0.40ml,再加pH8.2硼酸缓冲液2ml,混合后即为25倍稀释的乳胶液。

2.乳胶致敏 在上述乳胶液中滴加稀释的免疫血清0.20ml~0.70ml,边加边摇,当出现肉眼可见的颗粒后,仍继续加血清,直至颗粒消失,成为均匀的乳胶悬液为止。镜下检查应无自凝。使用时,应与一定稀释度的相应抗原出现阳性反应,与生理盐水出现阴性反应为合格。加防腐剂后,于冰箱内保存。注意防止冰冻。

同时以正常血清代替免疫血清进行乳胶致敏,以作对照。

3.取洁净玻板一块,用玻璃铅笔划成小格,滴加待检样品0.10ml,再滴加高免血清致敏乳胶0.01ml,以牙签或火柴杆混匀,在3min内判定结果。


结果判定

“++++”:全部乳胶凝集,成絮状团块,液体清亮。

“+++” : 大部分乳胶凝集成较小的颗粒,液体清亮。

“++” : 半量乳胶凝集成细小颗粒,液体混浊。

“+” : 较少量的乳胶凝集成可见的细颗粒,液体混浊。

“-” : 全部乳胶仍为均匀液体,无颗粒。

以“++”作为该反应滴度的终点。

 

 
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