平板凝集反应

材料与试剂

以布氏杆菌病平板凝集反应为例。

1．玻璃板、刻度吸管等。

2．布氏杆菌平板凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清。

操作方法

1．取洁净玻板一块，用玻璃铅笔划成方格，并注明待检血清号码。

2．取０.２ml吸管分别吸取0.08ml、0.04ml、0.02ml和0.01ml各放入一方格内。大规模检验时，可只做２个血清量，大动物用0.04ml和0.02ml，中小动物用0.08ml和0.04ml。每检一个样品需换一只吸管。

3．每格内加布氏杆菌平板凝集抗原0.03ml，滴在血清附近，而不要与血清接触。用牙签（或火柴杆）自血清量最小的一格起，将血清与抗原混匀，每份血清用一根牙签。

4．混合完毕，将玻板置凝集反应箱上均匀加温或采用别的办法适当加温，使温度达到３０℃左右。3min～5min内记录结果。

结果判定

＋＋＋＋：出现大的凝集块，液体完全清亮透明，即100％凝集。

＋＋＋　：有明显的凝集片，液体几乎完全透明，即75％凝集。

＋＋　　：有可见的凝集片，液体不甚透明，即50％凝集。

＋　　　：液体混浊，有小的颗粒状物，即25％的凝集。

－　　　：液体均匀混浊，即不凝集。

以出现＋＋凝集的血清最高稀释倍数作为该份血清的凝集价。大动物（牛、马、骆驼等）以0.02ml出现凝集价判为布氏杆菌病血清阳性，0.04ml出现凝集价判为可疑。中小动物（猪、山羊、绵羊等）以0.04ml出现凝集价判为该份血清为布氏杆菌病阳性血清，0.08ml出现凝集价判为可疑。

注意事项

1．每次试验必须以标准阳性血清和标准阴性血清进行对照。

2．加抗原前必须摇匀。

3．反应温度最好保证在30℃左右，3min～5min内判定。如反应温度偏低，可适当延

长判读时间。

4．如用两个血清量作试验，任何一个血清量出现凝集反应时，则需要用四个血清量重检。

5．平板凝集反应最好是用于初筛，如出现阳性或可疑反应，再用试管凝集反应进行复检，以定性。

6．平板凝集反应与试管凝集反应的关系。

表 平板凝集反应与试管凝集反应的关系