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培训|菌种保存常见问题答网友问汇总!

放大字体  缩小字体 发布日期:2019-07-22  来源:食品伙伴网  浏览次数:65
核心提示:菌种保存常见问题答网友问汇总。
1.菌株保存的是第三代,-80℃保存,再取出来活化的话属于第几代?

答:保存的是第三代复活出来后,如果采用平板或肉汤活化相当于转接了一代,就是第四代了,如果还在瓷珠里的话就还是原来的代数。如果是保存在斜面上,这一支斜面一直就是第三代,如果转接到另一支斜面就是第四代了。传代原则,菌株活化复苏不论以任何形式繁殖了一次就算是传了一代。但如果仅是物理位置的转移没有繁殖就不是传代,需要注意。

 

2.刚买回来的阳性菌株是第0代吗?

答:一般菌株你买回来的时候上面都会写明第几代,常规来说都是第0代的。像购买的ATCC或CICC的冻干粉都是标记为0代的。

 

3.菌株传代保存到瓷珠里一定要挑单菌落吗?

答:不一定非挑单菌落,但是一定要挑相同特征的菌落,就是说从同一个菌落纯化出来的,以保证它们的特性完全一致。原则是尽量多挑,宁多勿少。

 

4.菌株保存是-70℃还是-80℃有具体标准规定么?

答:其实是有标准的,《SN/T 2632-2010 微生物菌株常规保藏技术规程》是关于菌株保藏的一个标准,大家可以学习一下,各个保存方式都有介绍,但是瓷珠是比较新兴的保存方式暂时里面还没有收录。

 

5.怎样延长菌株的保存时间呢?

大量的实验证明菌株在低温、干燥、缺氧、缺营养的条件下保存效果是最好的,越接近这种保存条件,菌株的保存时间越长。

 

6.怎样纯化菌株?

纯化就是从TSA上或别的非选择性平板上转接一次,这就相当于纯化了。

 

7. 我们保存的一代菌株是不是要重新传代保存呢,认证老师会不会认为这是个错误?

答:应该不会,认证老师不会提出这种问题的,不过最好是一代菌株保存一些、二代菌株保存一些,使用时工作菌株最好使用第三代菌株,一代菌株可作为长期保存用。

 

8. 为何要将第三代作为工作菌株?

答:多传代几次后菌株的活力会明显提高,但最多传代到第五代后就不能用了,因为第五代后菌株虽然不会完全变异,但变异率会明显增加,因此选用第三代作为工作菌株是比较合适的,若使用第一、第二代菌株活力没有那么强。

 

9.用瓷珠管反复上下摇匀,有泡沫不容易吸出来,怎么办?

答:不必特别剧烈大尺度的摇动瓷珠管,稍微上下晃动就可以;如果确实有泡沫的话可以静置一会,让菌株多吸附一下瓷珠也是可以的。

 

10. 老师,霉菌需要长出孢子保存,可有霉菌孢子的图片,长到什么程度就可以保存了呢?


保存这种黑色孢子就可以,这是黑曲霉的图片。

 

11. 瓷珠管液体混匀可以吹吸么?

答:不建议吹吸,因为空气里可能也带有部分的细菌,万一使用的枪头等有菌混进去就不太好了,直接拧紧保存管盖子后上下摇晃即可。

 

12. TSA斜面一般多少度保存,可以放在冷藏里吗?

答:2-8℃保存,放在冷藏是可以的;注意弧菌和绿脓杆菌要放到室温20-25℃保存,否则会很快死亡。

 

13.如果TSA斜面放在冷冻里面,会有什么影响?

答:琼脂冷冻后性状会发生改变,会变得很软,结构发生改变,所以不建议冷冻;如果要冷冻的话就采用甘油保存法或瓷珠保存法。

 

14.用瓷珠管保存产气荚膜梭菌老是保存不好!做好瓷珠管之后瓷珠管要放到厌氧袋里面再放到-20℃么?

答:如果冷冻保存最好放在厌氧袋里再-20°保存,保存效果还可以;或者可以采用庖肉培养基保存,它是一种液体培养基,将产气荚膜梭菌接进去然后2-8 ℃保存,可以保存一年没有问题,在厌氧环境下保存效果最好。

编辑:songjiajie2010

 
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